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油紅0脂肪染色

油紅0脂肪染色

簡要描述:
油紅0脂肪染色是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內的脂肪常采用油紅O進行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內能高度溶解,可特異性的使組織內甘油三酯等中性脂肪著色。

更新時間:2024-09-12

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廠商性質:其他

油紅0脂肪染色:是一種在生物化學和病理學領域廣泛應用的染色技術,主要用于顯示組織或細胞內的脂肪成分。


一、油紅0脂肪染色原理

   油紅O是一種脂溶性染料,具有很強的脂溶劑和染脂劑的特性。它能夠與組織和細胞內的中性甘油三脂、脂質以及脂蛋白發生特異性吸附作用,從而使脂肪呈現紅色。在染色過程中,油紅O染料從有機溶劑中轉移到組織內的脂質中,使脂質顯現出紅色,而細胞核等其他成分則通過其他染色方法(如蘇木素復染)呈現藍色,從而便于觀察和區分。


二、染色步驟

油紅O脂肪染色法的基本步驟包括切片固定、染色、分化、復染和封片等環節。以下是一個典型的染色流程:

  1. ?切片固定?:將冰凍切片或細胞爬片進行固定處理,確保樣本的穩定性和可染性。固定劑可以是4%多聚甲醛或其他合適的固定劑,固定時間根據實驗需要而定。

  2. ?染色?:將固定好的切片或細胞爬片放入油紅O染色液中,進行密閉染色。染色時間通常為10-15分鐘,具體時間可根據實驗條件和樣本特性進行調整。在染色過程中,需要注意避光操作,以防止染料分解。

  3. ?分化?:染色完成后,使用適當濃度的酒精(如75%酒精)對切片進行分化處理,以去除多余的染料和背景色。分化時間要嚴格控制,以免過度分化導致脂肪滴顏色過淺。

  4. ?復染細胞核?:使用蘇木素或其他合適的染料對切片進行復染,使細胞核呈現藍色。復染時間也要根據實驗條件進行調整,以確保細胞核染色清晰。

  5. ?封片?:最后,使用甘油明膠或其他合適的封片劑對切片進行封片處理,以保護切片并便于后續的觀察和分析。

三、注意事項

  1. ?染液配制?:油紅O染液的配制需要嚴格控制各成分的比例和濃度,以確保染色效果的一致性和穩定性。同時,染液應新鮮配制并避光保存,以防止染料分解和沉淀。

  2. ?切片厚度?:切片的厚度對染色效果有很大影響。一般來說,冰凍切片的厚度應控制在6-10μm之間,以確保脂肪滴能夠充分顯示并避免切片過厚導致的染色不均。

  3. ?染色條件?:染色過程中需要嚴格控制溫度、濕度和光照等條件,以確保染色結果的準確性和可重復性。同時,還需要注意避免切片干燥和產生氣泡等問題。

  4. ?結果判讀?:染色完成后,應在顯微鏡下對切片進行仔細觀察和分析。脂滴應呈現紅色或橘紅色,細胞核應呈現藍色。根據染色結果可以判斷組織或細胞內的脂肪含量和分布情況。



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